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原代細胞分離培養都有哪幾種方法?

更新時(shí)間:2022-06-14點(diǎn)擊次數:1432
  研究中常用的細胞系/株系是現成的,我們只需要進(jìn)行細胞傳代和種子保存。然而,這些細胞系往往因長(cháng)期體外培養而失去原有的生物學(xué)特性,對藥物治療的反應差距越來(lái)越大。因此,越來(lái)越多的人選擇原代細胞。來(lái)源于胚胎、組織、器官和外周血,經(jīng)特殊分離方法制備的原代培養細胞稱(chēng)為原代細胞。原代細胞培養,也稱(chēng)為原代培養,是從供體獲得的組織細胞在體外的培養。
  
  原代細胞是接近和最能反映體內生長(cháng)特性的細胞,適用于藥敏試驗、細胞分化等實(shí)驗研究。原代細胞分離培養都有哪幾種方法?
  

原代細胞分離培養

 

  1、組織培養法
  
  組織培養是一種常見(jiàn)、簡(jiǎn)單且成功的原代細胞分離培養方法?;痉椒ㄊ菍⑶邢碌男〗M織塊接種到培養瓶(或培養皿)中。瓶壁可預先涂上一層薄薄的膠原蛋白,以利于組織團粘附在瓶壁上,使周?chē)募毎仄勘谙蛲馍L(cháng)。
  
  2、消化培養法
  
  組織消化法是將組織切成小塊(或糊狀),通過(guò)酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用,使細胞間的橋接結構進(jìn)一步松散,使團塊由團塊變成絮狀。此時(shí),采用機械法用稻草吹散細胞團塊,或在搖瓶中進(jìn)行電磁攪拌或搖動(dòng),使細胞團塊充分分散,制成少量細胞團塊和大量單細胞細胞懸液,接種培養后,細胞易貼壁生長(cháng)。
  
  3、懸浮細胞培養
  
  懸浮生長(cháng)的細胞,如胸水和腹水中的白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、癌細胞和免疫細胞,不需要被消化??梢缘退匐x心分離直接培養,也可以用淋巴細胞分層液分離后接種培養。
  
  4、器官培養
  
  器官培養是指從供體獲得的器官或組織塊在體外特定環(huán)境條件下不進(jìn)行組織分離的培養,器官培養可以保持器官和組織的相對完整性,可用于觀(guān)察細胞之間的連接、排列和相互作用,以及局部環(huán)境的生物調節。
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